Высокоэффективная жидкостная хроматография
Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) – это метод анализа, используемый в химии, фармацевтике, биохимии, анализе окружающей среды и других областях. Он позволяет разделять и идентифицировать компоненты сложных смесей, а также количественно определять их содержание.
Метод ВЭЖХ основан на колоночной хроматографии, при которой для разделения компонентов пробы используются стационарная и подвижная фазы. Неподвижная фаза представлена колонкой с высокоэффективными частицами, такими как:
Метод ВЭЖХ основан на колоночной хроматографии, при которой для разделения компонентов пробы используются стационарная и подвижная фазы. Неподвижная фаза представлена колонкой с высокоэффективными частицами, такими как:
- диоксид кремния;
- оксид алюминия.
Образец вводится через инжектор, после чего он проходит через колонну, где компоненты разделяются на основе их взаимодействия со стационарной фазой. Детектор используется для измерения элюируемых компонентов и получения данных о них.
Для обработки результатов и их интерпретации используется система анализа данных. Этот процесс позволяет количественно определить компоненты образца.
ВЭЖХ может быть использован для анализа различных типов образцов, включая:
Для обработки результатов и их интерпретации используется система анализа данных. Этот процесс позволяет количественно определить компоненты образца.
ВЭЖХ может быть использован для анализа различных типов образцов, включая:
- небольшие органические молекулы;
- пептиды;
- белки;
- нуклеиновые кислоты.
Для чего нужен ВЭЖХ?
Одной из основных сфер применения высокоэффективной жидкостной хроматографии является определение идентичности, чистоты и концентрации лекарственных средств. Благодаря этому методу можно определить молекулярно-массовое распределение и состав полимеров, а также идентифицировать примеси и загрязняющие вещества, которые могут присутствовать в фармацевтических препаратах.
ВЭЖХ также очень полезен при анализе окружающей среды, а именно:
Другим важным аспектом высокоэффективной жидкостной хроматографии является ее применение при анализе биологических образцов (кровь, моча и т. д.). Благодаря этому методу можно изучать всасывание, распределение, метаболизм и выведение лекарственных средств из организма. Данный метод также позволяет очищать биополимеры и оценивать наличие микроэлементов и микрокомпонентов в натуральных продуктах и биомолекулах.
Лигандообменная и ионообменная хроматография – это особые виды высокоэффективной жидкостной хроматографии, которые используются для разделения и анализа различных смесей и соединений в процессе исследований и производственных целях.
ВЭЖХ также очень полезен при анализе окружающей среды, а именно:
- воды;
- воздуха;
- почвы.
Другим важным аспектом высокоэффективной жидкостной хроматографии является ее применение при анализе биологических образцов (кровь, моча и т. д.). Благодаря этому методу можно изучать всасывание, распределение, метаболизм и выведение лекарственных средств из организма. Данный метод также позволяет очищать биополимеры и оценивать наличие микроэлементов и микрокомпонентов в натуральных продуктах и биомолекулах.
Лигандообменная и ионообменная хроматография – это особые виды высокоэффективной жидкостной хроматографии, которые используются для разделения и анализа различных смесей и соединений в процессе исследований и производственных целях.
Чем отличается ВЭЖХ от ЖХ?
Одним из главных отличий ВЭЖХ от классического варианта ЖХ является разница в сорбентах, используемых в процессе хроматографии. В жидкостной хроматографии используются стеклянные колонки, заполненные сорбентом с размером частиц более 100 мкм. Эта техника работает на низкой скорости под действием силы тяжести.
В случае ВЭЖХ используются сорбенты с размером частиц 10-30 мкм, которые обеспечивают более высокую скорость разделения. Также используются поверхностные и объемные пористые сорбенты размером 5-10 мкм. Данный фактор позволяет улучшить возможность разделения.
Еще одним отличием ВЭЖХ является использование нагнетательных насосов, которые позволяют создавать высокое давление для перемещения жидкости через колонну. Важно отметить, что наличие чувствительных детекторов в ВЭЖХ позволяет более точно определять анализируемые вещества.
В случае ВЭЖХ используются сорбенты с размером частиц 10-30 мкм, которые обеспечивают более высокую скорость разделения. Также используются поверхностные и объемные пористые сорбенты размером 5-10 мкм. Данный фактор позволяет улучшить возможность разделения.
Еще одним отличием ВЭЖХ является использование нагнетательных насосов, которые позволяют создавать высокое давление для перемещения жидкости через колонну. Важно отметить, что наличие чувствительных детекторов в ВЭЖХ позволяет более точно определять анализируемые вещества.
На чем основан метод ВЭЖХ?
Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии основан на разделении компонентов смеси растворителей с использованием неподвижной и подвижной фаз. Основными характеристиками метода являются высокое давление, разрешающая способность и чувствительность.
При ВЭЖХ стационарная фаза представлена мелкими пористыми частицами гранулированного материала, которые располагаются в разделительной колонне. Подвижная фаза, или растворитель, прокачивается через колонну под давлением.
Прохождение подвижной фазы через колонну обеспечивает перемещение компонентов смеси. Когда образец вводится в подвижную фазу с помощью клапана и капилляра из нержавеющей стали, образец проходит через колонку.
Различные компоненты смеси имеют разную скорость перемещения внутри колонны из-за сильного взаимодействия со стационарной фазой. Компоненты с более сильным взаимодействием перемещаются медленнее и имеют более длительное время удержания на колонне, в то время как компоненты с более слабым взаимодействием перемещаются быстрее.
ВЭЖХ-детекторы регистрируют компоненты после их разделения и генерируют сигнал, который передается на персональный компьютер. Сигнал представлен пиками, которые соответствуют различным компонентам в смеси.
При ВЭЖХ стационарная фаза представлена мелкими пористыми частицами гранулированного материала, которые располагаются в разделительной колонне. Подвижная фаза, или растворитель, прокачивается через колонну под давлением.
Прохождение подвижной фазы через колонну обеспечивает перемещение компонентов смеси. Когда образец вводится в подвижную фазу с помощью клапана и капилляра из нержавеющей стали, образец проходит через колонку.
Различные компоненты смеси имеют разную скорость перемещения внутри колонны из-за сильного взаимодействия со стационарной фазой. Компоненты с более сильным взаимодействием перемещаются медленнее и имеют более длительное время удержания на колонне, в то время как компоненты с более слабым взаимодействием перемещаются быстрее.
ВЭЖХ-детекторы регистрируют компоненты после их разделения и генерируют сигнал, который передается на персональный компьютер. Сигнал представлен пиками, которые соответствуют различным компонентам в смеси.
Для обеспечения стабильного потока и определенного давления во время исследования используются специальные устройства – насосы для ВЖЭХ.
Сопутствующие товары:
Оставьте заявку и мы свяжемся с вами
Нажимая на кнопку, вы даете согласие на обработку персональных данных и соглашаетесь c политикой конфиденциальности.
Может быть интересно: